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产品名称: DTNB 5,5'-二硫双(2-硝基苯甲酸) 5,5'-二硫代-双(硝基苯甲酸)
产品型号:
产品时间: 2022-07-17
DTNB是5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(5,5'-Dithiobis-(2-nitrobenzoic acid)) 的简称。一方面它和碳酸氢钠以一定的比例而混合后用作产物乙酰胆碱的显色剂,显黄色,通常用于农残检测,它吸光度来反映酶的抑制率值,Z终用来初步判断农药是否超标。另一方面常用于检测游离的巯基(-SH),此时也称作Ellman试剂。
CAS:69-78-3
1g 5g 10g

产品介绍

英文名称: DTNB
中文名称: 5,5'-二硫双(2-硝基苯甲酸)
MF: C14H8N2O8S2
MW: 396.35
CAS: 69-78-3

 DTNB为Ellman试剂。它用于比色法测定生物样 品中巯基。它易溶于水。在巯基化合物的存在下,无色的DTNB将被转变成黄  色的5-巯基-2-硝基苯甲酸。由于5-巯基-2-硝基苯甲酸在412 nm处具有zui大吸收,DTNB的吸收光谱并不干扰巯基的测定。   

配置方法:

    准确称取0.198gDTNB用50mMNa2HPO4(pH=7.0)配制成50ml溶液,存放于棕色瓶中,于暗处低温保存备用。应该注意的是配置缓冲、浓度,储存时要避免见光。

应用举例:

    半胱氨酸中自由巯基的定量检测方法

一、试剂的配制:

1、Tris-HCL缓冲液(0.25M):DDW准确配制后,用盐酸调节pH=8.3;

2、半胱氨酸标准溶液(1mM):准确称取0.017563gL-半胱氨酸(175.63),用1ml甲酸溶解,以DDW定容至100ml;

3、DTNB(分子量:396.35)标准溶液(10mM):准确称取0.198175gDTNB用50mMNa2HPO4(pH=7.0)配制成50ml溶液,存放于棕色瓶中,于暗处低温保 存备用

4、DTNB分析溶液(0.1mM):由1体积10mMDTNB标准液加99体积0.25M的Tris缓冲液配制而成,现用现配。

二、标准曲线的制作;

1、25℃条件下,用Tris缓冲液稀释半胱氨酸标准液配成梯度的稀释液(5.0ml), 其浓度分别为:0.00mM、0.025mM、0.05mM、0.1mM、0.15mM、0.2mM;

2、取上述各浓度溶液1ml分别加入到5ml预先恒温于25℃水中的DTNB分析溶液,摇匀,准确静止10min,立即于波长412nm处测定吸光度值(A)。

根据目的蛋白的吸光度在标准曲线上读出对应的浓度即可

Product Name:DTNB

Product Number:D8130

Product Brand:Sigma

CAS Number:69-78-3 

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